Papel de las NADPH Oxidasas en la señalización inducida por TGF-[beta] en hepatocitos

Abstract

El TGF-Beta (transforming Growth Factor beta) induce un proceso de apoptosis en los hepatocitos fetales de rata. Este fenómeno de apoptosis es disparado por un incremento en el contenido de ROS ( Reactive Oxygen Species) intracelulares, que precede a los eventos apoptóticos posteriores (caída del potencial de membrana mitocondrial, salida de citocromo-c al citosol, activación de caspasa-3) y a tiempos más largos produce una caída en los niveles intracelulares de glutación. Al estudiar la fuente responsable de estas ROS iniciadoras del proceso apoptótico, se determinó que se trataba de una actividad NADPH oxidasa. Tras estudiar la expresión de los distintos miembros de la familia de NADPH oxidasas, Nox. Y su regulación por TGF-Beta, se encon tró que Nox4 es inducida por el tratamiento con TGF-Beta. Esta regulación es dependiente de la actividad del receptor de TFG-Beta tipo I, puesto que el empleo de un inhibidor químico de dicho receptor, impide completamente esta inducción. Paralelame nte, el receptor TGF-Beta produce activación de Rac1, una pequeña GTPasa que se ha implicado en la activación de algunos de los miembros de la familia Nox. Sin embargo, la inhibición de Rac1, así como el empleo de un inhibidor del ensamblaje de las subunidades citosólicas de las Nox (apocinina), no evita las acciones pro-apoptóticas del TGF-Beta sobre los hepatocitos fetales de rata. Sin embargo, la inhibición de Rac1 si bloquea parcialmente la producción de Nox4 por TGF-Beta, necesaria para la actividad pro-apoptótica de este factor, sucede a nivel transcripcional y es atenuada por las señales anti-apoptóticas que el TGF-Beta induce en hepatocitos fetales de rata. En hepatocitos fetales humanos, el TGF-Beta produce muerte celular, que coin cide con un incremento en los niveles de MRNA de Nox4 y una disminución en los de Nox1. Además, al estudiar este fenómeno en líneas de hepatocarcinoma celular humano, se observa que la respuesta al TGF_Beta en términos de muerte celular se correlaciona con la inducción de Nox4. En resumen, los resultados presentados en este trabajo indican que la inducción de Nox4 por TGF-Beta se requiere para su eficiente actividad pro-apoptótica en hepatocitos. Esta respuesta puede estar impedida en las células tumorales hepáticas que son resistentes a la muerte promovida por TGF-Beta. De acuerdo con esto, Nox4 podría desempeñar un papel supresor en la ruta del TGF-Beta en el hígado. Por otro lado, se ha estudiado el efecto protector del EGF sobre la...