Análisis y caracterización de imágenes de microscopia de muy baja luminosidad. Automatización del análisis citogenetico

Resumen

Esta tesis presenta y evalúa una metodología para el análisis automático de muestras de hibridacion in situ fluorescente sobre núcleos celulares en interfase. La metodología, basada en técnicas de programacion y control de sistemas, utiliza algoritmos de procesado digital de imagenes para realizar de modo completamente automatico, la deteccion y enumeracion de sondas cromosomicas marcadas con fluorescencia sobre nucleos en estado no mitotico. La metodologia, diseñada a parti del estudio del fenomeno de la fluorescencia, de los dispositivos de adquisicion de imagenes y de las caracteristicas de las imagenes de microscopia, abarca la eleccion de la instrumentacion, la secuencia de acciones que componen el analisis automatico, la eleccion de los algoritmos mas adecuados para enfoque y la segmentacion, ambos automaticos, de las imagenes, la calibracion del metodo y la correccion de los errores de percepcion. A partir de la metodologia descrita se implemento un prototipo, que ha servido para la evaluacion del funcionamiento de las distintas partes que componen el metodo, y para ilustrar los procesos de discriminacion, calibracion y correccion de errores del metodo. La evaluacion del sistema ha sido satisfactoria, tanto desde el punto de vista temporal como desde el punto de vista de la precision de las medidas realizadas por el prototipo, por lo cual se propone utilizarla como base para el desarrollo de sistemas comerciales para su uso en rutina clinica. La utilizacion de estos sistemas aumentaria la calidad del servicio de los laboratorios de citogenetica, al permitir el analisis citogenetico de un mayor numero de pacientes por dia, y de una manera mas comoda e igualmente fiable que el tradicional analisis manual de las muestras.