Combinación de anticuerpos monoclonales inmunoestimulantes para el tratamiento del cáncer

Resumen

Los anticuerpos monoclonales inmunoestimulantes han mostrado tener eficacia terapéutica en el tratamiento de tumores sólidos y hematológicos. Los anticuerpos monoclonales agonistas estimulan receptores de membrana presentes en diversos tipos celulares del sistema inmune, induciendo una activación del mismo, mimetizando la acción de su ligando natural. Por el contrario, los anticuerpos monoclonales antagonistas, bloquean la interacción de los receptores inhibidores con sus ligandos naturales. De esta forma, la combinación de anticuerpos monoclonales agonistas dirigidos a receptores activadrores del sistema inmune y anticuerpos monoclonales dirigidos a bloquear moleculas inhibidoras, induce un aumento en la activación del sistema inmune. Todo ello deriva en una mayor proliferación, capacidad citolítica, supervivencia y generación de memoria inmunológica, que favorece el rechazo de las céluals tumorales y la erradicación del cáncer, así como la prevención de nuevas redivivas. En esta tesis se ha estudiado la combinación de anticuerpos monoclonales dirigidos a estimular CD137 y OX40 (con anticuerpos anti-CD137 y OX40) e inhibir la interacción de la interacción PD-1 - B7-H1 (con anticuerpos anti-B7-H1). CD137 y OX40 son dos receptores activadores presentes en la membrana plasmática de linfocitos T activados y su estimulación ha mostrado evidencia preclínica en diversos modelos de ratón así como en ensayos clínicos con pacientes. B7-H1, es una molécula inhibitoria que se expresa en linfocitos T, células presentadoras de antígeno y células tumorales. Su interacción con PD-1 en linfocitos T activados inhibe la activación de los mismos. El bloqueo de esta interacción ha mostrado inducir rechazo tumoral en modelos en ratón y también en diversos ensayos clínicos con pacientes de cáncer. Para el estudio de la combinación de anticuerpos anti-CD137, anti-OX40 y anti-B7-H1 (Combo3), elegimos un modelo de ratón que desarrolla hepatocarcinomas autóctonos en el hígado de manera inducible por doxiciclina: el ratón c-myc OVA trangénico. Este ratón genera tumores mutlifocales agresivos que expresan OVA y tiene una mediana de supervivencia de 7 semana. Decidimos inducir la oncogénesis en el nacimiento de los ratones y tratarlos a las tres semnas con dosis de Combo3. Este tratamiento demostró alargar la supervivencia de los ratones y sinergizar con la terapia celular adoptiva de linfocitos OT1 y OT2 activados. El efecto de la Combo3 es dependiente de linfocitos T CD8, tal y como demuestran los exprimentos de depleción. El tratamiento con Combo3 induce un aumento del infiltrado de linfocitos T CD8 y CD4 con fenotipo activado (mayor número, fenotipo blástico y presencia de moléculas de coestimulación en mebrana). También incrementa la expresión de moléculas implicadas en citotoxicidad, tales como granzima B, perforina, e IFNy. En estudios de tolerancia observamos que los ratones c-myc OVA tg+ están altamente tolerizados frente al antígeno OVA y que esta tolerancia no es reversible mediante el tratamiento con Combo3. Dado que a Combo3 consigue rechazar estos tumores de manera dependiente de linfocitos T CD8, otros antígenos deben ser los que dirijan la respuesta inmune. De hecho, los linfocitos T CD8 del infiltrado tumoral de ratones tratados con Combo3 secretan IFN al restimularlos con líneas celulares derivadas de los hepatocarcinomas, pero no al restimularlas con líneas celulares control. Los antígenos que dirigen esta respuesta inmune son desconocidos. En conclusión, en esta tesis se ha demostrado que la combinación de anticuepros monoclonales inmunoestimulantes es capaz de inducir una fuerte respuesta inmune celular que es capaz de inducir el rechazo de tumores en este modelo de ratón que desarrolla hepatocarcinomas agresivos.