Diagnostico funcional de la hipercolesterolemia familiar

Resumen

LA HIPERCOLESTEROLEMIA FAMILIAR (HF) ES UNA ENFERMEDAD AUTOSOMICA MUY FRECUENTE QUE FAVORECE EL DESARROLLO DE ARTERIOSCLEROSIS. EN LA MAYORIA DE LOS CASOS SE DEBE A MUTACIONES EN EL GEN QUE CODIFICA EL RECEPTOR DE LDL (RLDL). EL DIAGNOSTICO RUTINARIO ES CLINICO-BIOQUIMICO, Y DADOS LOS INCOVENIENTES QUE PRESENTA, SE COMPLEMENTA CON EL DIAGNOSTICO GENETICO (DIRECTO O INDIRECTO) Y EL FUNCIONAL. EL DIAGNOSTICO GENETICO INDIRECTO ESTUDIA LA CONSEGREGACION DE MARCADORES CON LA PRESENCIA DE LA ENFERMEDAD. UN MARCADOR MUY INFORMATIVO ES EL POLIMORFISMO APALI EN EL INTRON 15 DEL GEN RLDL, PERO SI SE ANALIZA POR PCR (Y NO SOOTMERN) APARECE COMO CONSTANTE.EN ESTA TESIS HEMOS DETERMINADO QUE ESAS INCONSISTENCIAS SEDEBEN A QUE LA SECUENCIA DE RECONOCIMIENTO PARA APA LI ES CONSTANTE, SIENDO POLIMORFILA LA BASE POSTERIOR, ATG, DE FORMA QUE SE INDUCE O NO LA METILACION DE LA SECUENCIA DE RECONOCIMIENTO Y ADA LI NO PUEDE CORTAR. A TRABAJAR CON PLR EL ADN NO ESTA MODIFICADO Y LA ENZIMA SIEMPRE PUEDE CORTAR. EL DIAGNOSTICO GENETICO DIRECTO IDENTIFICA MUTACIONES EN EL GEN RLDL, EN ESTA TESIS SE HA COMPLETADO EL BARRIDO DE GRANDES REORDENAMIENTOS MEDIANTE SOUTMERN CON 2 DIGESTIONES,CON LAS QUE SE HAN DETECTA 5 ALELOS DIFERENTES EN 6 PROBANDOS, LO QUE SUPONE QUE SU FRECUENCIA EN NUESTRA POBLACION ES DEL 7% TRES DE ELLOS PRESENTAN EL PROMOTOR Y PRODUCEN ARNm QUE ESTAN ES PAUTA, Y EL PUNTO DE RUPTURA EN EL ADN SE ENCUENTRA DENTRO DE SECUENCIAS ALU. POR OTRA PARTE, SE HAN DETECTADO (POR PCR-SSCP) 44 PEQUEÑAS MUTACIONES EN 76 DROGANDOS HF. ESTAS MUTACIONES SON MUY VARIADAS Y SE DISTRIBUYEN POR TODO EL GEN, SIENDO LA MAS PREVANTE 112 INS A, CON UN FRECUENCIA DEL 11%, SEGUIDA DE C95R Y C3584 (5%). EL RESTO MUTACIONES SUPONEN UNA FRECUENCIA DEL 1-3%. EL DIAGNOSTICO FUNCIONAL ESTUDIA SI EL RECEPTOR DEL LDL QUE EXPRESAN CELULAS DE PACIENTES TIENE DIMINUIDA SU ACTIVIDAD. EN ESTA TESIS SE HA PUESTO A PUNTO UN PROCEDIMIENTO QUE PERMITE CUANTIFICAR LA FUNCIONALIDAD