Estudio del inhibidor de diferenciación 1 (id1) como factor predictivo y pronóstico en cáncer

Resum

En este trabajo se ha estudiado el papel del inhibidor de diferenciación 1 (Id1) en cáncer no microcítico de pulmón (CNMP) y cáncer de próstata (CaP). En el caso de CNMP también se ha estudiado el papel de Id1 mediante experimentos en líneas celulares. Primero se llevaron a cabo estudios funcionales en líneas comerciales de CNMP y posteriormente se estudió el papel de Id1 en la resistencia al tratamiento en líneas primarias de adenocarcinoma de pulmón. Las líneas celulares de CNMP obtenidas de pacientes provenían de derrames pleurales malignos (DPM) confirmados mediante citología. En el caso del CNMP se llevo a cabo un estudio en 356 pacientes donde se analizó la expresión proteica de Id1 mediante inmunohistoquímica (IHQ) utilizando un anticuerpo monoclonal contra Id1 (Biocheck 195-14). En primer lugar se observó una mayor expresión de Id1 en tejido tumoral con respecto a tejido sano (p<0,001). Dicho análisis se llevo a cabo en muestras pareadas de tejido sano y tumor obtenidas en 65 de los pacientes. También existía una diferencia significativa en la expresión de Id1 al comparar las dos histologías más frecuentes en CNMP en todas las series de pacientes (estadios iniciales y metastásicos). Los carcinomas escamosos expresaban más Id1 que los adenocarcinomas (p<0,001). En pacientes estadio I-III tratados de forma radical con intención curativa y en pacientes metastásicos tratados con quimioterapia con intención paliativa, niveles mas altos de Id1 se asociaban con una disminución tanto en la supervivencia libre de enfermedad o progresión (SLE/SLP) como en supervivencia global (SG) mediante el análisis de las curvas de supervivencia con un Log-rank, en el subgrupo de adenocarcinomas. Para confirmar que los niveles de Id1 eran un factor pronóstica independiente en los adenocarcinomas se realizó un análisis mediante un modelo de Cox en este subtipo histológico. En ambos grupos Id1 resultó ser un factor pronóstico independiente. Con esos resultados se llevo a cabo un estudio In silico analizando los niveles de ARNm de Id1. En dicho análisis se observó que los niveles de altos de Id1, en este caso de ARNm, predecían una peor SG en el grupo con histología de adenocarcinoma. Se llevaron a cabo estudios In vitro inhibiendo Id1 mediante ARNsh en líneas comerciales y en líneas obtenidas de pacientes. En las líneas comerciales se observó una mayor expresión de Id1 en aquellas líneas con histología de carcinomas escamosos. También se observó una disminución en la capacidad proliferativa, mediante un ensayo clonogénico, al disminuir Id1. En las líneas primarias, obtenidas de DPM, la disminución de Id1 disminuyó la capacidad proliferativa así como la resistencia de las líneas a la quimioterapia o radioterapia. En el análisis de las muestras de CaP se observó inmunotinción positiva para Id1 en las células tumorales, en las células del endotelio vascular y en las células de la capa basal de glándulas sanas adyacentes a zonas tumorales. Era llamativa la ausencia total de Id1 en las células tumorales de pacientes con estadios iniciales y la presencia, en ese mismo grupo de pacientes, de inmunotinción al estudiar Id1 en las células de la capa basal de glándulas sanas peritumorales. En los pacientes con CaP se observó que los niveles más altos de Id1 en células tumorales primarias o la presencia de Id1 en células de la capa basal de glándulas sanas peritumorales disminuía la SG. Al realizar el modelo de Cox, se perdía el valor pronóstico de la determinación proteica de Id1 en las células tumorales y en las células de la capa basal. Posteriormente se realizó un estudio in silico para analizar si los niveles de Id1 de ARNm también predecían pronóstico, observándose en el análisis univariante una disminución en la SG en aquellos pacientes con niveles altos de ARNm. Debido a la falta de datos en la base consultada no se pudo completar el análisis con un modelo de Cox.