Expresión de receptores cannabinoides CB1 y CB2 y de adenosina A2A en los núcleos de salida de los ganglios basales del primate parkinsoniano

Resumen

Los sistemas cannabinoide y adenosinérgico están involucrados en la fisiopatología del síndrome parkinsoniano. El receptor cannabinoide CB1 se expresa de forma ubícua en el cerebro y ha sido motivo de estudio por su viabilidad como diana terapéutica en el síndrome parkinsoniano. El papel y expresión neuronal del segundo receptor CB2 es menos conocido, pero sus similitudes estructurales y funcionales con CB1 y su expresión restringida a los núcleos de la base lo hace atractivo como diana farmacológica por la posibilidad de estar exento de efectos secundarios. El receptor adenosinérgico A2A, con una señalización opuesta al de los receptores cannabinoides, también ha sido objeto de estudio por su expresión en los núcleos de la base y varios ensayos clínicos avalan su viabilidad como diana farmacológica. La mayor parte de trabajos han obviado su papel sobre los núcleos de salida y la vía palidotalámica, lugar de convergencia de la información procedente del estriado y última vía de paso en la circuitería de los núcleos de la base antes de alcanzar el córtex frontal. El objetivo primario de este proyecto de tesis doctoral ha sido la investigación de la expresión y posibilidad de heteromerización de los receptores CB1, CB2 y A2A en el globo pálido interno y vía palidotalámica de macacos controles, parkinsonianos (modelo de intoxicación sistémica con MPTP) y discinéticos (tratados con dosis crecientes de L-DOPA). Para su consecución se utilizaron 15 macacos que recibieron la inyección de los trazadores BDA y CTB guiados por cirugía estereotáxica para caracterizar la vía estriatopalidal (vía directa) y palidotalámica. Asimismo, se utilizaron diversas técnicas de laboratorio: reacción en cadena de la polimerasa (PCR), hibridación in situ (HIS), inmunohistoquímica (IHQ), inmunofluorescencia (IF), transferencia de energía de resonancia bioluminiscente (BRET) y ensayo de ligación por proximidad (PLA). En este estudio se ha demostrado la expresión de los receptores CB1, CB2, con niveles inferiores al receptor CB1, y A2A en las neuronas de proyección del GPi a nivel somatodendrítico, estando ausentes a nivel de terminales axónicos estriatopalidales y palidotalámicos. A nivel subcelular se han localizado en membrana plasmática, citoplasma y en la región perinuclear. En segundo lugar se ha observado un incremento del transcripto de CB1 en los macacos parkinsonianos y un decremento de ambos receptores cannabinoides ante el tratamiento con L-DOPA. El receptor adenosinérgico no está influenciado por la depleción ni el tratamiento sustitutivo dopaminérgico. En tercer lugar se ha demostrado que los receptores CB1 y CB2 pueden formar heterodímeros entre ellos y con el receptor A2A en macacos control y parkinsonianos y éstos sufren una reducción de sus niveles en los macacos discinéticos, en línea con lo descrito para el transcripto de los receptores cannabinoides. En conclusión, estos datos han puesto de manifiesto la expresión y heterodimerización de los receptores cannabinoides y A2A en la región somatodendrítica en el GPi y su expresión diferencial dependiendo del estado dopaminérgico, lo cual ha de ser tenido en cuenta para el diseño y evaluación de terapias farmacológicas futuribles.