Aplicación del diagnóstico molecular in vitro mediante componentes en alergia a Anisakis simplex

Abstract

Introducción: El Anisakis simplex es un nematodo que tiene un ciclo vital complejo que se desarrolla en su totalidad en el mar y necesita varios hospedadores intermedios. El estadio infectivo es el tercer estadio larvario (L3), cuando el A. simplex se encuentra parasitando peces o cefalópodos. Sin embargo puede parasitar al ser humano accidentalmente tras consumir pescado infectado con la larva viva. La alergia a A. simplex tiene una alta prevalencia en nuestra región debido al hábito de consumir pescado fresco y pescado marinado. Cerca del 25% de las reacciones alérgicas a A. simplex se manifiestan en forma de anafilaxia y pueden ser potencialmente peligrosas para la vida. Además, el A. simplex puede ser responsable hasta del 10% de las reacciones de anafilaxia atendidas en un centro hospitalario, siendo una de las principales causas de anafilaxia en España. El diagnóstico de alergia a A. simplex presenta muchas dificultades debido a que los métodos de diagnóstico habituales, pruebas cutáneas y determinación de IgE específica, frente al extracto completo de A. simplex resultan positivas en muchos pacientes cuyas historias clínicas son incompatibles con la alergia a dicho parásito. Se ha descrito que un 75% de pacientes con urticaria y hasta un 15% de sujetos sanos, están sensibilizados a A. simplex. Esto unido a que no disponemos de un ¿Gold standard¿ debido a que las pruebas de provocación con larvas liofilizadas no producen reacciones adversas en pacientes alérgicos, hacen necesaria una exhaustiva historia clínica para el correcto diagnóstico de los pacientes. Sin embargo, debido al avance de la biología molecular, se ha desarrollado el diagnóstico basado en componentes moleculares, que puede ser de gran utilidad en el diagnóstico de alergia a A. simplex. Por ello, el objetivo de este trabajo fue valorar la capacidad diagnóstica de los alérgenos recombinantes de A. simplex, Ani s 1 y Ani s 3, comparándola con la del extracto completo de A. simplex. Material y métodos: Se estudiaron 34 pacientes alérgicos a A. simplex, 15 pacientes con urticaria aguda y sensibilizados a A. simplex pero cuya historia clínica no era compatible con alergia a este parásito, 10 pacientes alérgicos a mariscos y 22 pacientes atópicos. Se compararon distintas técnicas de diagnóstico con los componentes moleculares rAni s 1 y rAni s 3, así como el extracto completo, tanto in vivo, mediante pruebas cutáneas (PC), como in vitro, mediante determinación de IgE específica (ELISA e ISAC 112) y mediante el test de activación de basófilos (TAB). Resultados: La sensibilidad obtenida con el alérgeno Ani s 1 fue del 100% empleando las PC, el ELISA y el ISAC 112, mientras que con el TAB fue del 97%, similar a la sensibilidad obtenida con el extracto completo de A. simplex. Sin embargo, la especificidad obtenida con el alérgeno Ani s 1 fue mayor que la obtenida con el extracto completo, siendo del 100% con las PC y del 92-96% con las técnicas in vitro. Además, tras realizar curvas ROC y elevar ligeramente el punto de corte de las técnicas de determinación de IgE específica, ELISA e ISAC 112, la especificidad aumentó al 100%, manteniendo una sensibilidad del 100%. Frente al alérgeno rAni s 3, únicamente encontramos sensibilización en 3 pacientes alérgicos a A. simplex y en 5 pacientes alérgicos a tropomiosinas. Conclusiones: La determinación de IgE específica frente a Ani s 1 es capaz de diagnosticar al 100% de los pacientes alérgicos a A. simplex, siendo negativa en pacientes sensibilizados a A. simplex sin historia clínica compatible con alergia a dicho parásito. El alérgeno Ani s 3 no es la principal proteína causante de alergia a A. simplex ni es la causante de la sensibilización asintomática debido a reactividad cruzada. La técnica diagnóstico que tiene mayor capacidad diagnóstica son las pruebas cutáneas, seguido de la determinación de IgE específica mediante ISAC 112.