Análisis molecular de 20 familias españolas afectadas por la enfermedad de Gaucheridentificación y caracterización de las mutaciones responsables de la enfermedad y estudio de la relación genotipo/fenotipo mediante mutagénesis dirigida y expresión de las proteínas mutantes en células cos-1

Resumen

En este trabajo se presenta el estudio clínico y molecular de la Enfermedad de Gaucher en los pacientes pertenecientes a veinte familias españolas, cuyas muestras fueron remitidas para estudio a la Fundación Española para el Estudio y Terapéutica en la Enfermedad de Gaucher en 1995 y 1996. El estudio llevado a cabo consta de tres partes bien diferenciadas: una primera parte en la que se ha realizado la identificación del 95% de las mutaciones del gen de la betaglucocerebrosidasa (GBA), contribuyendo a su mejor conocimiento con la identificación de dos nuevas mutaciones y el descubrimiento de otras previamente descritas. Una segunda parte, llevada a cabo en el laboratorio de Neurogenética del Dr. Pastores de la Universidad de Nueva York, donde se expresan cada una de las mutaciones anteriormente detectadas y se comparan las actividades residuales obtenidas con el DNA salvaje del GBA. Y una tercera parte en la que se realiza una correlación estadística entre el genotipo encontrado en los pacientes y el fenotipo final expresado. La Introducción ha sido realizada tras una amplia revisión bibliográfica y se exponen los aspectos clínicopatológicos, genéticos y moleculares más relevantes de la Enfermedad de Gaucher. En Material y Métodos se detalla en primer lugar el Material con todos aquellos aparatos, reactivos y productos químicos utilizados. Los Métodos se han expuesto iniciando el fundamento de cada una de las técnicas para luego explicar el procedimiento a seguir para realizarlas. Los Resultados se inician con el estudio detallado de la muestra, posteriormente, la identificación de mutaciones y el análisis de la expresión de cada una de ellas, para finalizar con un estudio estadístico de la correlación genotipo/fenotipo. El trabajo termina con la Discusión y las Conclusiones que de este estudio han derivado.