Caracterización del metabolismo de las lipoproteínas de alta densidad en diversas situaciones experimentales en rata

Résumé

En este trabajo se estudiaron las características de la ingesta aguda de aceite de oliva virgen extra en estado posprandial, utilizando la rata como modelo animal. Tras caracterizar la rata en este aspecto del metabolismo, con picos de trigliceridemia a las 4 y 8 horas, se valoraron los niveles plasmáticos de triglicéridos, colesterol y fosfolípidos, así como el estudio del transcriptoma hepático, y búsqueda de genes implicados en los cambios observados mediante RTqPCR fuertemente correlacionados con la trigliceridemia, y los triglicéridos y colesterol hepáticos. También se realizó la separación de distintas lipoproteínas mediantes FPLC, realizando analíticas de todas las fracciones obtenidas, para APOA1, APOA4, triglicéridos, colesterol total, libre y esterificado, fosfatidilcolina y esfingomielina. Se estudió la expresión génica hepática e intestinal para justificar los cambios observados mediante el análisis de genes que modulan y forman parte de las HDL. Se buscaron nuevos genes de referencia, estudiando en distintos tejidos un panel con 17 genes estudiados mediante estadística clásica, y con programas específicos de estabilidad génica, geNorm, NormFinder y BestKeeper. Se observo, que duodeno y yeyuno tenían mayor implicación en este aspecto del metabolismo, justificando los aumentos de APOA1, APOA4 y SMGS1, inhibidos en hígado. Finalmente, se trabajo con una rata transgénica Knock-Out para CYP7B1, realizando estudios en condiciones de ayuno, posprandiales, tras administración de una dieta aterogénica durante 3 meses e inyección de tyloxapol. El aumento de trigliceridemia en ayuno de los animales carentes de CYP7B1, pueden ser debidos a la ausencia casi total de rLDL.