Estudio de un componente polisacarídico de staphylococcus aureus y su utilización para vacuna frente a mamitis de rumiantes

Résumé

En este estudio se ha realizado la caracterización inmunológica y bioquímica de un componente polisacárido de Staphylococcus aureus (componente S). El primer paso consistió en la purificación de dicho componente a partir de la obtención de una serie de extractos crudos utilizando cepas de tipo PE (productoras de exopolisacáridos); estas cepas fueron seleccionadas atendiendo a la capacidad de adherencia y a la producción de biofilm de las mismas. A partir de aquí se utilizaron y compararon dos sistemas de purificación, la cromatografía de intercambio iónico y la electroelución. Tras la separación del componente se procedió a su estudio inmunológico con el empleo de sueros poliespecíficos obtenidos tras la hiperinmunización de ovinos y monoespecíficos, obtenidos por absorción de los anteriores y con el uso de técnicas como doble difusión en gen de agarosa, dot-blot e inmunoelectroforesis de 1 y 2 dimensiones; también se realizó un estudio bioquímico del azúcar purificado mediante la técnica de resonancia magnética nuclear. Posteriormente se pusieron a punto dos test ELISA, uno indirecto y otro de inhibición o competición para la detección y cuantificación respectivamente de dicho componente. Por último se realizó un estudio inmunológico de vacunación de ovinos gestantes con diferentes inóculos vacunales conteniendo el componente S de distintas maneras, así como una infección experimental posterior tras el parto de los animales que se comparó con la realizada en un grupo control de ovinos no vacunados.