Estudio de la expresion y regulacion del transportador de glucosa glut8 en tejido intestinal

Resum

GLUT8 es un transportador de glucosa recientemente clonado, que se expresa fundamentalmente en testículo, aunque también se ha detectado en otros tejidos como cerebro e intestino. En este trabajo hemos analizado la expresión y localización de GLUT8 en intestino de ratón en diferentes situaciones, utilizando técnicas de RT-PCR, western blot e inmunohistoquímica, y hemos estudiado la regulación de su expresión y su función utilizando métodos de transfección y cultivo celular. Nuestros resultados indican que GLUT8 se expresa en las células epiteliales absortivas de la mucosa en todo el tracto intestinal del ratón, incluido el colon, en una localización fundamentalmente supranuclear. Hemos observado también que en animales sujetos a ayuno durante 24 horas la expresión de GLUT8 disminuye ligeramente en yeyuno e ileon, mientras que la inducción experimental de un estado de diabetes provoca el incremento de la expresión del transportador en esos mismos segmentos intestinales. Asimismo, hemos detectado, aislado e identificado la expresión adicional de tres variantes transcripcionales producidas por un procesado alternativo de corte y empalme del gen GLUT8 en intestino de ratón, a las que hemos denominado SP1, SP2 y SP3. Hemos estudiado la posible función de estas tres variantes en la regulación de la expresión y función de GLUT8 transfectando células 3T3-L1 con los diferentes transcritos y hemos observado que tan solo la variante SP3, la más corta de las tres, tiene un efecto sobre la función de GLUT8, ya que la transfección de las células con esta variante induce un aumento de la expresión de su ARNm y un cambio en la localización de la proteína, que se transloca hacia a la membrana plasmática, provocando con ello, un aumento en el transporte de glucosa al interior de las células. Finalmente hemos estudiado la expresión de GLUT8 en la línea celular de carcinoma de colon humano Caco-2. Hemos observado que, sorp