Caracterización del efecto anticancerígeno del ácido maslínico, triterpeno pentacíclico de origen natural

Resumen

El ácido maslínico posee un potente y selectivo efecto anticancerígeno sobre las células de carcinoma de colón. Este efecto se ha demostrado por distintos ensayos utilizando dos líneas de cáncer de colon HT29 y Caco-2 que difieren en la expresión de ciertos oncogenes tales como p53, y dos líneas celulares normales IEC-6 e IEC-18. El efecto cancerígeno desarrollado por el ácido maslínico ocurre fundamentalmente siguiendo los siguientes procesos: Presenta un efecto citotóxico, cuantificado mediante el ensayo de viabilidad celular por MTT sobre las líneas cancerígenas HT29 y Caco-2. Este efecto citotóxico ocurre a través de la inducción de los procesos de apoptosis, determinada por: a) tinción con anexina V-FICT e yoduro de propidio, tanto por citometría de flujo como por microscopia de fluorescencia; b) aparición de picos sub-G0/G1 en el análisis del ciclo celular; c) condensación de la cromatina y aparición de cuerpos apoptóticos observados por microscopia de fluorescencia; d) patrón en escalera asociado con la formación del DNA apoptótico; y por último, e) un marcado incremento de la actividad caspasa-3. Además, parte de este efecto cancerígeno se apoya en un efecto diferenciador sobre líneas cancerígenas, especialmente sobre la línea tumoral HT29. Este efecto ha sido confirmado por: a) un marcado arresto en la fase G0/G1 del ciclo celular; b) un incremento de la actividad fosfatasa alcalina, enzima marcadora de diferenciación; y c) una disminución de la genotoxicidad del producto tiempo dependiente. Además, este efecto diferenciador se apoya en la marcada sobre-expresión de la proteína p53 en respuesta al tratamiento con ácido maslínico, proteína capaz de inducir arresto en el ciclo celular y diferenciación. De forma que, si tales procesos no han tenido éxito, p53 también es capaz de contribuir a la activación del proceso de apoptosis. En las células HT29, el ácido maslínico parece inducir apoptosis de una forma más tardía que en células Caco-2, según el mecanismo propuesto este compuesto activaría en primer lugar la ruta de inducción de apoptosis mediada por JNK, a continuación esta proteína quinasa activaría o inhibiría a distintas proteínas de la familia Bcl-2. En concreto se produce la sobre-expresión de los niveles de Bax y la disminución de los niveles de Bid-completo y Bcl-2. A continuación y en respuesta a estos fenómenos tiene lugar la permeabilización mitocondrial y la liberación de citocromo-c. Todo ello daría lugar a la formación del apoptosoma y a la activación de la caspasa-9, la cual a su vez activaría a la caspasa-3 y a la caspasa-7. Además, en estas células ocurre una sobre-expresión de los niveles de p53, tiempo y concentración dependientes, sobre-expresión que ha sido descrita en respuesta a la activación de JNK. Por otra parte, en las células Caco-2, el ácido maslínico induce inmediatamente un aumento en los niveles de caspasa-8 y caspasa-3, lo que conduciría directamente a la activación de los procesos de apoptosis. Además, en estas células también ocurre una disminución de los niveles de Bid-completo, con el consecuente aumento de t-Bid; un aumento en los niveles de Bax, y una disminución de los niveles de Bcl-2. Este mecanismo de activación produce, finalmente, la activación de la caspasa-9 que también contribuye a la activación de la caspasa-3. Por último, y para comprobar la existencia de un nexo de unión entre estos dos mecanismos, también se observó un incremento de los niveles de JNK en respuesta al tratamiento con ácido maslínico. Proponemos un mecanismo molecular de activación de apoptosis, en respuesta al tratamiento con ácido maslínico, mixto entre los dos mecanismos moleculares encontrados. En el que el ácido maslínico activaría un receptor de membrana tipo TNFR, lo que a su vez podría explicar la activación tanto de la caspasa-8 como de JNK, desencadenando los dos mecanismos propuestos. La activación de estas proteínas estaría relacionada con el tipo celular así como con el tiempo utilizado en el tratamiento. A partir de todos estos datos proponemos el ácido maslínico como un compuesto eficaz frente al tratamiento del cáncer de colon por su efecto anticancerígeno, apoptótico y diferenciador sobre líneas de células tumorales, siendo su efecto mucho menor sobre las líneas de células normales.