Estudio de los mecanismos de toxicidad hepática inducida por el tratamiento con un adenovirus portador del gen de la timidín kinasa del virus herpes simple y ganciclovir

Resumen

Una de las estrategias antitumorales basadas en terapia génica desarrollada recientemente, es la que utiliza la timidín-kinasa del virus Herpes-simple (HSV-tk) para convertir el profármaco ganciclovir en un metabolito tóxico que resulta letal para la célula. El ganciclovir produce la muerte celular debido a su capacidad para ser incorporado a la molécula de DNA e interrumpir su síntesis en células en división. En virtude de este mecanismo de acción, no debería resultar tóxico para células quiescentes, sin embargo se ha demostrado que el ganciclovir produce daño en el hígado sano. El objetivo de este trabajo ha sido investigar la repercusión del tratamiento con HSV-tk y ganciclovir en las mitocondrías del hígado, estudiando en particular si el tratamiento produce disfunción mitocondrial y daño en el DNA miticondrial. Se ha podido comprobar que la administración de ganciclovir a ratas sanas, que previamente habían recibido un adenovirus que codifica para HSV-tk, induce daño hepatocelular caracterizado por la presencia de metamorfosis grasa microgotular, balonización de hepatocitos y cuerpos apoptóticos. Ultraestructuralmente se confirma la alteración en la forma y tamaño de las mitocondrias que presentan crestas aberrantes y una matriz hipodensa. También se ha posido demostrar un descenso en la actividad de la enzima citocromo c oxidasa que forma parte de la cadena respiratoria mitocondrial. A esta alteración podría contribuir la disminución detectada en la expresión de una de las subunidades protéticas codificada por el ADN mitocondrial como es la subunidad II. El análisis de southern blot reveló una reducción substancial del contenido total de DNA mitocondrial en el hígado. Utilizando ganciclovir marcado radiactivamente se pudo demostrar la incorporación de este compuesto tanto en el DNA nuclear como mitocondrial de una línea celular hepática de rata que había sido transducida previamente con HSV