Relaciones funcionales entre los componentes del receptor multimérico de lps en monocitos humanos

Abstract

El lipopolisacárido es uno de los principales componentes de la superficie externa de bacterias gram negativas y constituyen un potente activador de las células del sistema inmunológico. Como consecuencia de la activación del sistema inmune se produce la liberación de mediadores pro-inflamatorios que itnervienen en la respuesta del organismo frente a la invasión de microorganismos, esta fase pro-inflamatoria es seguida por otra anti-inflamatoria, con atenuación de la respuesta inmune, en algunos pacientes puede predominar esta respuesta anti-inflamatoria induciendo un estado de inmunoparálisis, que empeora el pronóstico dramáticamente en el caso de contraer una segunda infección. Los monocitos presentan una capacidad reducida de respuesta, fenómeno que es conocido como "tolerancia a endotoxina". El receptor de LPS se ha descrito como una estructura compleja formada por una molécula reconocedora (CD14) y un complejo señalizador (TLR4/MD2). Además de la forma de membrana se ha descrito la presencia de CD14 soluble, responsable de la activación por LPS de células que no expresan CD14 en la membrana. Recientemente se ha descrito en humanos el papel de la familia de los receptores toll-like (TLRs) como reconocedores y activadores en respuestas a antígenos microbianos. En concreto, el TLR4 es una proteína transmembrana tipo I, con dominios extracelulares ricos en leucina y dominios citoplasmáticos conservados con homología con ILR1. El objetivo de este proyecto fue estudiar el papel de la molécular TLR4 como señalizador en la activación por LPS tanto en monocitos humanos que expresan CD14 de membrana como en monocitos deplecionados que se activan vía CD14 soluble, modelo que implica el tratamiento con brefeldina como agente bloqueador de la exocitosis para conseguir una regulación negativa de la expresión del CD14 de membrana. Dado el papel central del monocito en la respuesta inflamatoria estudiamos las relaciones fu