Terapia antitumoral mediante vectores basados en el virus del bosque de semliki que expresan interleuquina 12 en un modelo de adenocarcinoma de colon murino

Resumen

TITULO: TERAPIA ANTITUMORAL MEDIANTE VECTORES BASADOS EN EL VIRUS DEL BOSQUE DE SEMLIKI QUE EXPRESAN INTERLEUQUINA 12 EN UN MODELO DE ADENOCARCINOMA DE COLON MURINO RESUMEN: Con el fin de evaluar el uso de los vectores basados en alfavirus para el tratamiento antitumoral, se han construido y comparado dos vectores basados en el virus del bosgue de Semliki (sfv) que expresan diferentes niveles de inteleuquina 12 (IL-12). sfv-il-12 expresa ambas subunidades de la il-12 a partir de un único promotor subgenómico viral, mientras que en sfv-enhiL-12 cada subunidad de la il-12 está expresada a partir de promotores subgenómicos independientes y está fusionada con el enhancer de traducción de la cápsida de SFV. Esta última estrategia permite un incremento de los niveles de expresión de il-12 de unas 8 veces. Se eligió el modelo de adenocarcinoma de colon murino MC38, que es poco inmunogénico, para evaluar el potencial terapéutico de los vectores de SFV. Una única inyección intratumoral de 108 partículas virales de SFV-il-12 o SFV-enhiL-12 indujo más de un 80% de remisiones tumorales completas con una supervivencia libre de tumor a largo plazo. Sin embargo, menores dosis de SFV-enhiL-12 fueron más eficientes que SFV-il-12 induciendo respuestas antitumorales, indicando una correlación positiva entre los niveles de expresión de il-12 y el efecto terapéutico. Además, inyecciones intratumorales repetidas de dosis subóptimas de SFV-enhiL-12 aumentaron la respuesta antitumoral. En todos los casos los vectores de SFV fueron más eficientes eliminando tumores que un vector adenoviral de primera generación que expresaba il-12. La preinmunización de los animales con altas dosis de vectores de SFV generó anticuerpos neutralizantes que inhibieron la expresión del transgén tras la administración sistémica de vectores de SFV. Sin embargo, la infectividad tumoral o el efecto antitumoral de los vectores de SFV solo fue afectado moderadamente por estas preinmunizaciones. Además, se determinó que el efecto antitumoral producido por los vectores de SFV que expresaban il-12 se debía fundamentalmente a la inducción de una respuesta inmune mediada por CTL. Por otra parte, estudios de biodistribución realizados en ratones sanos con un vector de SFV que expresaba la luciferasa de luciérnaga (SFV-Luc) mostraron que administraciones sistémicas de este vector infectaron con alta eficiencia el pulmón y el corazón. En animales portadores de tumor se observó un patrón de infectividad similar tras administraciones sistémicas sin que hubiera infección del nodulo tumoral. En cambio, tras la inyección intratumoral de SFV-Luc la actividad luciferasa solo fue detectada en el área del tumor sin dispersarse a otros órganos