Análisis de la actividad endógena del factor derivado del epitelio pigmentado (pedf) en líneas celulares tumorales

Resum

TITULO: ANÁLISIS DE LA ACTIVIDAD ENDÓGENA DEL FACTOR DERIVADO DEL EPITELIO PIGMENTADO (PEDF) EN LINEAS CELULARES TUMORALES RESUMEN: El factor derivado del epitelio pigmentado (PEDF) es una glicoproteina miembro de la superfamilia de las serpinas. Fue descrito inicial mente como producto de secreción de las células del epitelio pigmentado de la retina, como factor con capacidad para producir diferenciación hacia un fenotipo neuronal. En relación con esto, se han descrito diversas actividades para PEDF como factor neurotrófico y neuroprotector en diferentes tipos neuronales. Recientemente se ha descrito su participación en la inhibición de la angiogenesis y su efecto como agente antitumoral. La angiogenesis es la generación de nuevos capilares a partir de vasos sanguíneos preexistentes y está regulada por un balance entre factores inductores (como el VEGF) e inhibidores de la misma. Es un proceso crucial para el desarrollo de un tumor y es un hecho que un tumor cuanto más vascularizado se encuentra, más maliginidad presenta. En este trabajo hemos analizado la expresión del factor proangiogénico, VEGF y del factor antiangiogénico pedf, en líneas tumorales de origen neuronal y pulmonar, comprobando que la expresión de PEDF disminuye en aquellos tipos tumorales que más grado de malignidad tienen y más vascularizados se encuentran. La expresión de VEGF por el contrario, no presenta variaciones en las células tumorales analizadas. A continuación, hemos estudiado la actividad biológica de pedf en líneas celulares derivadas de astrocitoma y de carcinoma de pulmón. pedf tiene una actividad autocrina sobre estas células inhibiendo su crecimiento. Estudiamos en profundidad la naturaleza de esta actividad en la línea de glioblastoma CCF-STTGl, la línea de astroglía SVGpl2 y la línea de carcinoma de pulmón de células no pequeñas A549. Los resultados muestran que PEDF induce la apoptosis en estas células que está mediada por la activación de la caspasa 3. Asimismo, hemos estudiado la localización intracelular de PEDF en las líneas CCF-STTGl y SVGpl2 mediante inmunocitoquimica. PEDF se localiza de manera dispersa en todo el citoplasma celular y en las células CCF-STTGl, se concentra especialmente en la región perinuclear. También se localiza en el núcleo de ambos tipos celulares aunque esta presencia es más evidente en las células SVGpl2. Los resultados que hemos comentado demuestran que PEDF tiene un importante papel regulador del crecimiento de las células estudiadas y que su expresión disminuida puede favorecer el desarrollo tumoral. Por otro lado su presencia en el núcleo de las células podría estar relacionada con una posible función, hasta ahora no descrita, como factor transcripeional