Resistencia de la transcriptasa inversa del hiv-1 al azt. Papel de la fosforolisis

Resum

Actualmente, el fármaco más utilizado en el tratamiento del SIDA es el AZT. Este compuesto, es un terminador de cadena, que al ser incorporado por la transcriptasa inversa (RT) al DNA en crecimiento, bloquea su enlongación. Sin embargo, la eficacia del tratamiento se ve reducida por la aparición de cepas de virus resistentes. Esta resistencia está asociada a la aparición de mutaciones en cinco codones de la transcriptasa inversa del HIV-1. Se ha encontrado una situación paradójica con este compuesto, ya que las RT mutadas aisladas de los virus resistentes muestran una sensibilidad al AZT similar a la RT silvestre en ensayos in vitro. A pesar de los múltiples estudios realizados no se ha llegado a encontrar diferencias significativas en el proceso de polimerización de las enzimas silvestres y mutadas, que pudieran explicar la elevada resistencia encontrada in vivo. Intentando buscar estas diferencias quisimos estudiar la reacción de polimerización y la inhibición por AZT, en presencia de distintos cationes divalentes. Mediante esta estrategia queríamos sacar a la luz posibles alteraciones del sitio catalítico de la enzima, provocados por las mutaciones. Hemos encontrado que la presencia de cadmio en el medio da lugar a un efecto diferencial entre enzimas, lo que indica que las mutaciones que confieren resistencia al AZT sí afectan al sitio catalítico de la enzima. Por otro lado, la ausencia de diferencias en la polimerización de las enzimas silvestre y mutadas ha llevado a los investigadores a estudiar otros mecanismos que pudieran afectar a la inhibición del AZT. Hasta ahora se pensaba que la incorporación de un terminador de cadena era un proceso irreversible. Sin embargo, se ha comprobado que el terminador puede ser eliminado mediante un proceso de fosforolisis mediado por pirofosfato o por un nucleótido, dando lugar al rescate de la cadena terminada. En un principio se achacó la resistencia a una mayor velocidad