Desarrollo de vectores virales adeno-asociados para transferencia génica al musculo y su aplicación a un modelo de cirrosis experimental
- ZARATIEGUI BIURRUN MIGUEL ANGEL
- Francisco Javier Novo Villaverde Director
Universidad de defensa: Universidad de Navarra
Fecha de defensa: 30 de mayo de 2002
- Jesus M. Prieto Valtueña Presidente
- Cristian Smerdou Picazo Secretario
- Miguel Chillón Rodríguez Vocal
- Ignacio López Goñi Vocal
- Miguel Pocoví Mieras Vocal
Tipo: Tesis
Resumen
La transferencia genica al músculo es una de las estrategias de terapia genica de mayor aplicabilidad hoy en día. El vector más prometedor para esta aplicación son los virus recombinantes adeno-asociados. Sin embargo su uso no esta exento de dificultades: la producción es difícil y el producto final está frecuentemente contaminado con adenovirus. Hemos desarrollado un sistema de complementación que hace uso del sistema cre-loxp para volver al adenovirus inempaquetable reduciendo asi su titulo en la preparación de rAAV. Hemos comparado la eficiencia y la duración de la expresión de los RAAV producidos con este protocolo con las de otros dos vectores de transferencia genica al músculo: el DNA-PVP y los híbridos HVJ-liposomas. Los resultados demuestran que la eficiencia de los RAAV aumenta con el tiempo llegando al máximo entre 8 y 16 semanas tras la inyección en músculos, tibialis anterior del ratón, mientras que el DNA-PVP tiene un máximo de expresión la primera semana tras la inyección. Los HVJ-liposomas mostraron eficiencias inferiores durante todo el estudio. Para comprobar la eficacia terapeutica de estos vectores in vivo utilizamos el modelo de cirrosis por inhalación de CCL4 e inyección de un AAV que codifica la IGF1 de rata. La inyección intramuscular de AAVIGF1 no produjo efecto terapéutico en las ratas cirroticas? Quedando su efecto recluido en el tejido inyectado y provocando hipertrofia muscular.