Desarrollo de la tecnica de fiction multicoloraplicaciones en el diagnostico e investigacion de los linfomas malignos

Resumen

Las tecnicas interdisciplinares que permiten la caracterización fenotípica y genotipica de las celulas tumorales se estan estableciendo como herramientas importantes para el diagnóstico e investigación de los tumores malignos. Uno de estos metodos es la tecnica de FICTION (Fluorescence Immunophenotyping and Interphase Cytogenetics as a Tool for the Investigation of Neoplasms). Esta tecnica permite analizar simultaneamente los aspectos morfologicos, inmunofenotipicos y geneticos de las celulas tumorales. Hasta la fecha las aplicaciones de la tecnica de FICTION han estado limitadas por el escaso número de sustancias fluorescentes utilizadas. En este trabajo, y para solucionar dicha limitación, se ha desarrollado una tecnica denominada FICTION multiculor (M-FICTION),que además de estudiar la morfologia y el inmunofenotipo celulares,permite la detección de alteraciones geneticas multiples. Se han desarrollado tres ensayos de M-FICTION para el diagnostico de los linfomas no-Hodgkin de celulas B(LNH-B), las neoplasias de celulas T(NCT) y el linfoma anaplásico de celulas grandes(LACG), mediante el uso de anticuerpos anti-CD20,-CD3 y ALK, respectivamente, en combinación con sondas de hibridación para las alteraciones genéticas primarias asociadas a los citados linfomas. Para el linfoma de Hodgkin, cuyas alteraciones geneticas asociadas son todavia una incognita, se diseñaron ensayos de FICTION y M-FICTION para estudiar la implicacion de los genes REL e IGH. Para demostrar la validez de la tecnica, los ensayos para los LNH-B, NCT y LACG se aplicaron en controles negativos y positivos, estableciendo asi su aplicabilidad diagnóstica. En el linfoma de Hodgkin(LH), se determinó que tanto las translocaciones del gen IGH como las amplificaciones de gen REL son dos de las alteraciones geneticas más frecuentes asociadas al LH. Las aplicaciones de la tecnica de M-FICTION no estan restringidas a las neoplasias hematológicas y, en un futuro pr