Estudio de la apoptosis cardiaca en la rata espontaneamente hipertensa. Implicacion del sistema renina-angiotensina

Abstract

Se ha demostrado que en el ventriculo izquierdo de la rata SHR la apoptosis está aumentada. Este trabajo se ha realizado para investigar si los mecanismos reguladores de la apoptosis estan alterados en el ventriculo izquierdo de la rata SHR y si la angiotensina II(AII) modifica dichos mecanismos. El estudio se ha efectuado en el ventriculo izquierdo de ratas WKY adultas, ratas SHR adultas y ratas SHR tratadas cronicamente con el bloqueante de los receptores AT1 losartan. Además, se han analizado los efectos de la AII en cardiomicitos aislados de ratas WKY y SHR adultas. Tras identificar in situ las celulas apoptoticas mediante la tecnica del TUNEL in vivo e in vitro, confirmando los resultados obtenidos in vitro mediante la detección de Anexina V, se midió la expresión de las proteinas Bax-a,Bcl-2,p53 y la activacion de la proteina caspasa-3 mediante Western blot. La expresión del gen BAX se determinó mediante Northern blot. En el estudio in vivo, las ratas SHR mostraban un aumento (P<0,05) de la apoptosis,de la cantidad de proteina Bax-a(P<0,05), y del indice de susceptibilidad a la apoptosis, de la cantidad de proteina Bax-a(P<0,05), y del indice de susceptibilidad a la apoptosis Bax-a/Bcl-2(P<0,05), comparadas con las ratas WKY. Los valores de ARNm del gen BAX enlas ratas SHR fueron similares a los de las ratas WKY. Las ratas SHR tratadas con losartán mostraban valores normales de apoptosis, Bax-a, Bcl-2 y cociente Bax-a/Bcl-2 y una disminución en la expresión del ARNm del gen BAX. En el estudio in vitro, la AII provocó un aumento(P<0,01) del indice apoptotico y de la expresión de la proteina Bax-a en los cardiomiocitos extraidos de ambas cepas de ratas,siendo estos efectos mayores (P<0,001) en las celulas extraidas de las ratas SHR que en las extraidas de las ratas WKY. El losartan (10-7 M) inhibió los efectos de la AII en ambas cepas de rata, mientras que la incubación con PD123319(10-7 M) inhibió la ap