Mecanismos moleculares de la apoptosis inducida por peptidos inmunomoduladores

Résumé

Hemos demostrado que un péptido sintético (Pa), que contiene un motivo estructural común (motivo "2-6-11") que se encuentra en diversas proteínas de la matriz extracelular y que es capaz de activar monocitos humanos en cultivo, induce apoptosis en los cultivos de monocitos, ya que tras la estimulación de los monocitos con Pa se produce un aumento del grado de condensación de la cromatina y de la fragmentación nuclear, así como de la exposición de fosfatidilserina en la cara externa de la membrana plasmática y de la fragmentación internucleosomal del DNA. Además, se observa proteolisis de dos biosubstratos de caspasas, PARP y D4-GDI y una disminución de los niveles de Bcl-2. Los extractos nucleares de monocitos incubados en presencia del péptido Pa, manifiestan una elevada actividad DNAasa con relación a los extractos de monocitos no tratados. El aumento de actividad nucleasa que se detecta a pH 7 en presencia pero no en ausencia de Ca2+ en los núcleos de monocitos incubados con Pa, disminuye por el pretratamiento de las células con el inhibidor de caspasas Z-DEVD-fmk. Estas nucleasas podrían estar reguladas también por poliADPribosilación. La apoptosis inducida por el péptido Pa está mediada por las tirosina quinasas solubles Src y Syk, esfingomielinasa ácida y caspasas, así como por p38. Esta última es activada por ceramida pero no por caspasas. La activación secuencial de ceramida y caspasas lleva a la activación de SAPK. Este proceso está regulado positivamente por AMPc, tal vez vía inhibición de PI3K. El NO tendría un papel antiapoptótico. Hemos demostrado asimismo que la beta-endorfina induce también apoptosis vía Ca2+ y cAMP.