Aplicacion de la reaccion en cadena de la polimerasa al diagnostico de la brucelosis bovina y humana

Résumé

La PCR con los cebadores denominados F4 y R2, derivados del 16S rRNA se aplicó a cultivo puro, a muestras de leche procedente de ganado bovino lechero y a muestras de sangre humana. A partir de cultivo puro se consiguió identificar todas las especies y biovariedades de Brucella. Sólo Ochrobactrun anthropi dio una banda clara de amplificación inespecífica. La secuenciación del 16S rRNA de varias cepas de O. anthropi permitió distinguir dos grupos. El análisis filogenético de esta molécula permite situar al grupo de hibridación 2 de O. anthropi más cercano a Brucella que al grupo de hibridación 1 de O. anthropi. Estos resultados, junto al grado de homología DNA-DNA y rRNA-DNA indican la necesidad de una revisión de este género al que se ha propuesto renombrar como O. intermedium. La sensibilidad diagnóstica de la PCR aplicada a muestras de leche fue del 87% y su especificidad del 100%. Esta técnica podría aplicarse como prueba complementaria a aquellas muestras de diagnóstico dudoso por serología y/o cultivo. La aplicación de la PCR al diagnóstico de la brucelosis humana resultó inespecífica.