Valoracion de los metodos de seleccion y expansion de precursores hematopoyeticos de medula osea y sangre periferica

Resum

Para aumentar el numero de pacientes que pueden beneficiarse del transplante de medula osea (tmo), es preciso desarrollar nuevas tecnicas que nos faciliten un mayor conocimiento de la hematopoyesis y puedan ser aplicadas en un programa de tmo. Con esta finalidad nos planteamos dos objetivos: 1. Desarrollar la tecnica de seleccion de celulas cd34+ con un metodo inmunomagnetico indirecto, valorando la importancia del tipo de muestra, criopreservacion previa de la misma y el tipo de anticuerpo monoclonal. 2. Desarrollar la tecnica de expansion en cultivo liquido de progenitores hematopoyeticos con diversos factores de crecimiento hemopoyetico, valorando si existen diferencias entre los distintos tipos de muestras, el efecto de distintas combinaciones de factores de crecimiento, de la criopreservacion, de la seleccion de celulas cd34+ y del recambio de medio y citocinas. De los resultados obtenidos se sacaron las siguientes conclusiones: 1. El metodo de seleccion utilizado permitio una recuperacion aceptable de celulas cd34+. El tipo de muestra y la criopreservacion previa de la misma no influyeron de forma significativa en los resultados de la tecnica. Por el contrario, el tipo de anticuerpo monoclonal utilizado modifico la efectividad de la tecnica. 2. Con los cultivos liquidos suplementados con citocinas es posible una expansion in vitro del numero de celula totales, cfu-m y celulas cd34+. El tipo de muestra, criopreservacion, diagnostico y recambio de medio y citocinas no modificaron los resultados de la tecnica. La seleccion de celulas cd34+ mejoro los resultados de amplificacion celular pero no de celulas cd34+.