Regulacion de la sintesis de citocinas por pentoxifilina y buflomedil en cultivo de queratinocitos estimulados con acetato de 13-forbol 12-miristilo (tpa) y acido urocanico

Abstract

Queratinocitos humanos procedentes de piel sana fueron cultivados durante largo tiempo en un medio libre de suero, y estimulados mediante 1ug/ml de acetato de 13-forbol 12-miristilo (tpa) y acido urocanico (au) (10-100ug/ml), que en su isomero cis es considerado un posible fotorreceptor cutaneo responsable de los fenomenos inflamatorios secundarios a radiacion uv-b.A nivel de arn (northern blot) y proteina (elisa), se midio la sintesis de las siguientes citocinas: tnf-x, il-1x, il-1b, il-4, il-6, il-8 y tgf-b1. Posteriormente se valoro la modulacion de esta sintesis mediante dos farmacos: la pentoxifilina (ptx) y el clorhidrato de buflomedil (cb) ambos a dosis de 100 y 1000ug/ml. El tpa aumento la expresion de arn de tnf-x, il-1-x, il-1-b y tgf-b-1. Se aprecio proteina activa de il-1-b en el sobrenadante de los cultivos en condiciones basales, sin modificarse sus niveles ni los de il-1-x- tras estimulo con tpa. No detectamos il-4 (arn ni proteina) y unicamente cantidades insignificantes de il-6 proteina. Obtuvimos concentraciones elevadas de il-8 en condiciones basales, que aumentaron tras estimulo con tpa. El au en sus dos isomeros no indujo cambios en la sintesis proteica de las citocinas. Se aprecio una leve tendencia a aumentar la expresion de los genes de il-1x y tnf-x tras la administracion de 100ug/ml de cis-au frente a trans-au y control. Tras estimulo con 1ug/ml de tpa, la ptx y el cb mostraron una tendencia a disminuir la expresion de arn de il-1x e il-1b. La ptx no inhibio la transcripcion de tnf-x, y si ligeramente la sintesis proteica. El cb inhibio la sintesis de proteina de tnf-x e il-8.