Diseño y sintesis de peptidos inhibidores de la infectividad del virus del sida (vih)

Resumen

Se sintetizaron tres grupos de peptidos para su uso en la inhibicion de la infectividad del virus del sida (vih): (1) pentadecapeptidos solapados de la glicoproteina de envuelta viral (gpl20), utilizados para obtener anticuerpos frente a los mismos en ratones balb/c, mediante inmunizacion conjunta con el determinante t helper fiseaiihvlhsr; (2) derivados de la secuencia pol(151-161), como posibles inhibidores de la proteasa viral; y (3) derivados de cd4(81-92), con determinados residuos sustituidos por fenilalanina, como posibles inhibidores de la interaccion gpl20-cd4. Se obtuvieron anticuerpos frente a casi todos los peptidos de gpl20. Asimismo, casi todos los peptidos fueron reconocidos por uno o mas sueros procedentes de pacientes vih-1-seropositivos. La presencia de muchos de estos anticuerpos en los pacientes, postulamos que podria deberse a su elicitacion por fragmentos de gpl20. Los anticuerpos obtenidos mediante inmunizacion conjunta con fiseaiihvlhsr de los peptidos 61-75, 86-100 106-120, 206-220, 301-315, 306-320, 421-435, 471-485, 481-495, 486-500, 491-505, 496-510 y 491-505 reconocieron a gpl20 recombinante. De estos antisueros solo mostraron cierta actividad neutralizante los obtenidos frente a 106-120, 301-315, 306-320, 486-500 y 491-505. Los peptidos pl56c, pl56w y pl56y derivados de la secuencia pol(151-161) son inhibidores de la infeccion por vih-1 in vitro, con ic50s de 0,18; 4,33 y 15,35 m-respectivamente en celulas molt-3, y de 13,64; 3,44 y 12,53 m respectivamente, en celulas ht4lacz-1. Los mejores inhibidores de la infeccion in vitro en celulas ht4lacz-1 obtenidos a partir de la secuencia cd4(81-92) fueron fyicfvedokeedd (ic50= 2,20 m), fyicfvede (ic50= 1,60 m) y fyicfved (ic50= 1,22 m). El mecanismo de inhibicion de estos peptidos es el del bloqueo de la union gpl20-cd4 previa a la entrada del virus en la celula, como se pudo demostrar mediante ensayos de fusion celular y mediante elisa de captura d