Cultivo in vitro de epidermis

Resumen

Las perdidas de sustancia cutanea graves, hecho observado fundamentalmente en pacientes quemados, comportan un elevado indice de morbimortalidad. La solucion terapeutica mas adecuada incluye la realizacion de autoinjertos epidermicos. La tecnologia de cultivo celular, anteriormente dirigida a la investigacion del crecimiento y diferenciacion celular, ofrece una alternativa terapeutica, al posibilitar la obtencion in vitro de injertos cutaneos. Existen dos problemas fundamentales en el desarrollo in vitro de la epidermis: la escasa proliferacion de los queratinocitos y el control del crecimiento de otros tipos celulares. Con objeto de estudiar el crecimiento in vitro de la epidermis y desarrollar un protocolo reproducible de creacion de injertos cutaneos, se ha planteado el presente trabajo, en el que la epidermis como explante y como celulas aisladas por accion enzimatica, son cultivados en distintas condiciones, en funcion de la existencia o no de feeder layer, asi como de la procedencia de tales celulas y el control de su proliferacion. Del estudio experimental se concluye el escaso desarrollo epidermico bajo la forma de explantes y la necesidad de una feeder layer no proliferativa y homogenea para el correcto establecimiento y desarrollo de las colonias epiteliales. Asi mismo, la irradiacion de los cultivos de celulas 3t3 con fotones de 15 mev de valor nominal procedentes de un acelarador lineal constituyo la mejor tecnica para impedir el sobrecrecimiento de los fibroblastos. Finalmente se ha demostrado la estructura epitelial del tejido generado, asi como la existencia de melanina y la presencia de queratinas de amplio espectro y de alto peso molecular.