Análisis del exón 4 del isotopo HM40 de beta tubulina en pacientes con cáncer de pulón de células no pequeñas avanzado y su relación con la respuesta a paclitaxel

Abstract

La resistencia a la quimioterapia es la causa fundamental de la ineficacia de los tratamientos frente al cáncer de pulmón de células no pequeñas (CPCNP) en estadios avanzados (IIIB y IV). Paclitaxel está considerado como uno de los tratamientos de primera línea en estos tumores. A pesar de ser un agente eficaz en los primeros meses de administración, el tratamiento a medio plazo invariablemente se asocia con una selección de clones celulares resistencias a su actividad. Se han descritos múltiples mecanismos de resistencia a éste fármaco pero uno de los mejor caracterizados in vitro es la aparición de mutaciones en la diana del fármaco, esto es una beta tubulina. En el único estudio clínico realizado hasta la fecha se asoció la presencia de mutaciones de beta tubulina (la mayoría localizados en el exón 4) con una ausencia completa de respuesta al paclitaxel en monoterapia. Aunque estos datos eran concordantes con los aportados en estudios in vitro posteriores trabajos sugerían que una mezcla de pseudogenes de beta tubulina podrían estar produciendo artefactos en los resultados obtenidos in vivo. Por estos motivos hemos secuenciado mediante PCR el exón 4 del isotipo más frecuente de beta tubulina (HM40) utilizando por un lado las parejas de primeras empleadas en el único estudio clínico existente (exónicas) y por otro parejas similares a las empleadas en los estudios que sugerían la presencia de pseudogenes de beta tubulina (intrónica). Los resultados de nuestro estudio con parejas intrónicas son similares a los obtenidos en el único estudio clínico publicado hasta la fecha. Aunque no se alcanza significación estadística la presencia de mutaciones en el exón 4 de beta tubulina se corresponde con una tendencia a la resistencia en todos los casos evaluados. Los resultados obtenidos con primers intrónicos son idénticos a los publicados utilizando este tipo de parejas. Al descartar el error técnico como causa