Caracterización funcional de la subunidad PA de la polimerasa del virus de la gripe
- Amelia Nieto Martín Doktorvater/Doktormutter
Universität der Verteidigung: Universidad Autónoma de Madrid
Fecha de defensa: 21 von Februar von 2003
- Juan Antonio García Álvarez Präsident/in
- María rosa Estaban Cañibano Sekretär/in
- Agustín Portela Moreira Vocal
- José María Almendral del Río Vocal
- Crisanto Gutiérrez Armenta Vocal
Art: Dissertation
Zusammenfassung
La subunidad PA de la polimerasa del virus de la gripe es una fosfoproteína que induce la degradación proteolítica de proteínas coexpresadas con ella. Mutantes puntuales de la subunidad PA en sitios de fosforilación por la enzima casín kinasa II están afectados en su actividad inductora de proteólisis. Además las RNPs reconstituídas in vivo con dichos mutantes están afectadas en la replicación del genoma viral, más concretamente en el paso de síntesis de cRNA a partir de vRNA. En esta tesis se demuestra que la proteína PA presenta actividad proteasa in vitro sobre sí misma y sobre otros substratos. También se generaron virus de la gripe recombinantes con mutaciones en Pa que están afectadas en proteólisis. El virus con una mutación en la treonina 157 resulta tener afectado el transporte al núcleo de la proteína PA y ser defectivo en la replicación además de estar atenuado en su patogénesis en ratones. Se identificó también una nueva proteína celular que interacciona con PA in vivo e in vitro. Esta proteína, denominada hCLE, se nucelariza en células que sobreexpresan la subunidad PA de la polimerasa y colocaliza con las RNPs activas del virus de la gripo., hCLE es homóloga a la parte central del factor de transcripción de levaduras Cdc68, siendo capaz de recuperar el fenotipo de levaduras termosensibles para dicha proteína.