Expressió i regulació dels transportadors de monosacárids intestinals i renals

Resumen

En esta tesis se ha estudiado la adaptación de los transportadores de monosacáridos intestinales y renales a distintas situaciones fisiológicas y fisiopatológicas como: desarrollo, regionalización del transporte en el intestino, adaptación a ingestas como contenido variable de Na+ y la adaptación a la hipertensión arterial. Previamente se había descrito cómo el transporte de monosacáridos a través de los epitelios intestinal y renal se modula y se adapta a la nueva situación mediante cambios en su capacidad de transporte. La realización del trabajo ha permitido poner a punto las técnicas de aislamiento de RNA mensajero y Northern blot para obtener un protocolo que resulte en soluciones de RNA con baja contaminación por proteínas y DNA genómico, partiendo de enterocitos aislados. En el estudio de la expresión del transportador SGLT1 durante el desarrollo se obtuvo una proteína de 75 kDa que disminuye durante el desarrollo. En cambio la expresión del mRNA correspondiente, de 3,8 kb no se modificaba en ninguna de las edades estudiadas, demostrando la regulación mediante un mecanismo de control post-transcripcional. En el transporte basolateral a través del GLUT2 se observa una regulación transcripcional distinta de la observada en el SGLT1. En los estudios de regionalización se observó que el SGLT1 se expresa en intestino delgado y grueso de pollo. Se encuentra sometido a una distribución regional, con mayor abundancia en los segmentos proximales que en los distales. Esta reducción en el transportador no se acompaña de cambios paralelos en la abundancia del RNA mensajero, con lo que se deduce que se encuentra regulado mediante un mecanismo, post-transcripcional. La abundancia del mRNA del GLUT2 basolateral presenta una regulación regional, con valores mayores en duodeno y yeyuno que decrecen hasta llegar a ciego y recto, demostrando una regulación transcripcional. La adaptación a una ingesta con bajo