Transportadores heteroméricos de aminoácidosnuevas subunidades ligeras (lat-2 y asc-1) y estudio funcional de mutaciones en y+lat-1 y rbat

Zusammenfassung

En esta tesis han sido estudiados diferentes miembros de la familia de transportadores heteroméricos de aminoácidos. Los resultados se resumen a continuación: Las mutaciones L334R, G54V, M50K, G338D, S386R, W242X, 1181-2A-T, 1291delCTTT, 1548dlC y 1746delG de y+LAT-1 presentes en pacientes de LPI anulan la actividad de transporte de aminoácidos cuando se coexpresan con 4F2hc en oocitos de Xenopus. El hecho de que las mutaciones L334R y G54V se expresen en la membrana plasmática indica que se trata de mutaciones inactivadoras de la actividad de transporte y, por lo tanto, deben afectar residuos cruciales para la función de y+LAT-1. LAT-2 pertenece a la familia de subunidades ligeras de transportadores heteroméricos de aminoácidos. La expresión de LAT-2 junto con 4F2hc en oocitos de Xenopus induce transporte de aminoácidos neutros de tamaño grande y pequeño, independiente de ión sodio, de elevada afinidad y transestimulable. En riñón, LAT-2 se expresa en las células epiteliales del túbulo proximal. Asc-1 pertenece a la familia de subunidades ligeras de transportadores heteroméricos de aminoácidos. La expresión de 4F2hc/asc-1 en oocitos de Xenopus y células HeLa induce transporte de aminoácidos neutros de pequeño tamaño (D- y L- isómeros), independiente de ión sodio y de elevada afinidad, mediando difusión e intercambio. En riñón, asc-1 se expresa en células epiteliales de los tramos delgados del asa de Henle, el túbulo distal y el conducto colector. Se descarta la implicación de asc-1 en cistinuria por el hecho de que éste no se localiza en el túbulo proximal, no se han encontrado mutaciones en su gen en pacientes de cistinuria y el mutante asc-1(E112D), sugerido como específico de cistinuria, es plenamente funcional. Los mutantes en cisteínas de rBAT C18S, C114S, C242S, C273S y C685S son plenamente funcionales. Por el contrario, el mutante de rBAT C571S anula la actividad de transporte inducida, e