Papel de una etanolamina-fosfato transferasa y una glicosil transferasa en la síntesis del lipopolisacárido de brucella y utilización de una acetil transferaas para la modificación epitópica de la cadena o

Résumé

La brucelosis es una de las zoonosis bacterianas más importantes y afecta a mamíferos terrestres y marinos. El lipopolisacárido de Brucella tiene un papel crucial en la virulencia y es considerado como un patrón asociado a patógeno alterado. En este trabajo, hemos investigado la función de dos hipotéticas glicosil transferasas de lipopolisacárido [BAB1_0351 (wadB) y BAB1_1620] y de una hipotética etanolaminafosfato transferasa (BMEI0118). El mutante wadB en B. abortus (BABwadB), B.melitensis y B. suis biovar 2 carece de parte del núcleo del lipopolisacárido, pero mantiene intacta la cadena O. BABwadB es más sensible al suero y a los péptidos bactericidas y está atenuado en células dendríticas y en ratones. Además, es capaz de inducir una respuesta inmune protectora. Por otro lado, BAB1_1620, una glicosil transferasa relacionada con otras implicadas en la síntesis del lipopolisacárido, parece no estar relacionada con este proceso en B. abortus. Así mismo, su función no es esencial para la virulencia en ratones. Por otra parte, hemos demostrado que la proteína codificada por BMEI0118 (BMElptA) actúa como una transferasa que incorpora etanolamina-fosfato al lípido A. Esta modificación contribuye al bajo reconocimiento del lipopolisacárido por parte de algunos efectores del sistema inmune innato, ya que el mutante en BMELptA es más sensible al efecto bactericida del suero normal y a los péptidos catiónicos. Esta ORF presenta ortólogos en otras -2 Proteobacteria como Ochrobactrum, Sinorhizobium y Agrobacterium. La interferencia de la vacunación en el diagnóstico es un aspecto crucial para el control de la brucelosis, ya que los anticuerpos generados, dirigidos principalmente frente al lipopolisacárido, son comunes a animales infectados y vacunados. La expresión en Brucella de wbdR (acetil transferasa de cadena O en E. coli O 157:H7) lleva a la incorporación de residuos acetilo a la perosamina, generando un nuevo epítopo inmunogénico. Esta modificación posibilitará la elaboración de un nuevo test diagnóstico.